Daftar isi
Pengenalan Alat-Alat Laboratorium Mikribiologi
Bab I. Pendahuluan
A. Latar Belakang
Sebelum memulai bekerja di laboratorium, setiap mahasiswa diharapkan sudah mengetahui atau mengenal berbagai jenis peralatan standar yang secara umum diperlukan, digunakan dan disimpan dalam laboratorium. Peralatan yang ada di suatu laboratorium, khususnya di Laboratorium Ilmu Penyakit Tumbuhan, dapat dikelompokkan menjadi dua besar yaitu kelompok peralatan yang sederhana dan peralatan besar yang lebih rumit. Peralatan sederhana dapat dioperasikan dan digunakan dengan mudah oleh setiap mahasiswa tanpa perlu keterampilan khusus, misalnya berbagai peralatan gelas dan keramik standar, timbangan, dan bunsen. Peralatan yang lebih besar dan rumit memerlukan penanganan yang lebih khusus atau memerlukan teknisi untuk mengoprasikannya.
Dalam kegiatan praktikum pertama ini, mahasiswa akan mendapat kesempatkan kesempatan untuk mengenali berbagai jenis alat laboratorium beserta masing-masing fungsinya dan pemahaman prinsip kerjanya.
B. Tujuan Praktikum
- Mengenal berbagai jenis peralatan standar dalam laboratorium
- Mengetahui nama dan fungsi dari alat-alat yang ada di laboratorium
- Mengetahui prinsip kerja dari setiap alat yang ada di laboratorium
II. METODOLOGI
2.1 Alat dan Bahan
Alat-alat laboratorium yang akan diperkenalkan terdiri dari : alat-alat gelas dan peralatan sederhana seperti cawan petri, pipet ukur, pipet tetes, tabung reaksi, labu erlenmeyer, mortar & pastle, gelas beker/beaker glass, tabung durham, gelas ukur, bunsen burner, jarum ose, jarum ent, PH meter universal, pinset, rubber bulp,cover glass & preparat,drygalski dan mikropipet. Sedangkan peralatan lain yang lebih besar dan cukup rumit seperti mikroskop majemuk, mikroskop stereo, oven, autoklaf, incubator, hotplate, magnetic stirrer, orbital shaker, colony counter, Laminar Air Flow(LAF), spectrophometer dan water stiller.
2.2 Cara Kerja
Dalam praktikum kali ini ada beberapa cara kerja yang harus dilakukan yaitu : alat-alat yang telah disiapkan di dalam laboratorium diamati dengan baik dan di gambar pada kertas HVS. Pada setiap gambar diberikan keterangan berupa rincian nama, bagian-bagian alat dan fungsinya. Kemudian, pada alat yang rumit dan penting, ditulis penjelasan singkat tentang prinsip kerjanya .
III. HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN
3.1 Hasil Pengamatan
No Foto Gambar Nama Alat
1
Cawan Petri
2
Pipet Ukur
3
Pipet Tetes
4
Tabung Reaksi
5
Erlenmeyer
6
Mortar & Pestle
7
Beaker Glass/ Gelas Beker
8
Gelas Ukur
9
Driglasky
10
Bunsen Burner / Pembakar Bunsen
11
Jarum Ose
12
Jarum Ent
13
pH Meter Universal
14
Pinset
15
Ruber Bulp
16
Cover Glass dan Preparat
17
Tabung Durham
18
Mikropipet
19
Mikroskop Majemuk
20
Mikroskop Stereo
21
Oven
22
Autoklaf
23
Incubator
24
Orbital Shaker
25
Hot Plate
26
Magnetic Stirrer
27
Colony Counter
28
LAF (Laminar Air Flow)
29
Spectrop Hotometer
30
Water Distiller
3.2 Pembahasan
Alat-alat yang akan digunakan di dalam Laboratorium Mikobiologi terdiri dari alat-alat yang terbuat dari kaca, alat-alat yang sederhana sampai alat-alat yang lebih rumit dalam penerapannya. Adapun alat-alat yang terbuat dari kaca antaralain:
• Cawan petri
adalah sebuah wadah yang bentuknya bundar dan terbuat dari kaca atau plastik yang digunakan untuk membiakkan sel. Cawan Petri selalu berpasangan, yang ukurannya agak kecil sebagai wadah dan yang lebih besar merupakan tutupnya.. Alat ini digunakan sebagai wadah untuk penyelidikan tropi dan juga untuk mengkultur bakteri,Spora,khamir,biji-bijian.
• Pipet ukur (measuring pipette)
Pipet Ukur berfungsi untuk memindahkan larutan atau cairan ke dalam suatu wadah dengan berbagai ukuran volume. Untuk ukuran volume pada Pipet ukur yang paling besar adalah pipet ukur dengan volume 50ml.
• Pipet tetes (drop pipette)
Pipet tetes adalah jenis pipet yang berupa pipa kecil terbuat dari plastik atau kaca dengan ujung bawahnya meruncing serta ujung atasnya ditutup karet. Berguna untuk mengambil cairan dalam skala tetesan kecil.
Terkadang saat melakukan percobaan reaksi kimia di laboratorium, bahan yang kita perlukan jumlahnya tidaklah terlalu besar sehingga tidak bisa diukur dengan alat ukur yang berskala. Untuk keperluan itu dipeargunakan pipet tetes. Pipet tetes ini hanya digunakan untuk bahan yang bersifat cair. Jika ada bahan padatan yang harus diukur menggunakan pipet tetes, maka padatan tersebut harus terlebih dahulu di larutkan.
Pipet tetes berfungsi untuk memindahkan cairan dari wadah satu ke wadah yang lain dalam jumlah yang sangat sedikit yaitu setetes demi tetes. Pemindahan cairan dengan menggunakan pipet tetes memang memakan waktu yang lama, tapi demi keakuratan percobaan, biasanya hal itu tersebut memang terpaksa dilakukan. Pipet tetes terdiri dari berbagai ukuran. Semakin besar ukuran pipet tetes, maka semakin besar pila jumlah cairan yang diteteskan.
• Tabung reaksi
Deskripsi Tabung reaksi adalah tabung yang terbuat dari sejenis kaca yang dapat menahan perubahan temperatur dan tahan terhadap reaksi kimia. Tabung reaksi disebut juga Test Tube atau Culture tube. Culture tube adalah tabung reaksi tanpa bibir yang biasanya digunakan dalam pembiakan mikroorganisme pada medium cair. Tabung reaksi ada yang dilengkapi dengan tutup ada juga yang tanpa tutup. Tabung reaksi terdiri dari berbagai ukuran tergantung kebutuhan. Tersedia berbagai ukuran tabung reaksi. Besarnya ukuran tabung reaksi ditentukan berdasarkan ukuran diameter. Berbagai macam ukuran tabung reaksi, antara lain: 10×75 mm;12×100 mm;16×150 mm; dan 24×150 mm. Dalam penggunaannya, tabung reaksi biasanya dibantu dengan penjepit kayu untuk memudahkan pemanasan bahan yang direaksikan dan untuk menghindari bahaya yang ditimbulkan dari suatu reaksi kimia. Fungsi Fungsi tabung reaksi adalah sebagai berikut. Tabung reaksi digunakan sebagai tempat mereaksikan dua atau lebih zat dalam skala kecil. Tabung reaksi berfungsi sebagai tempat pengembang-biakanan mikroba, misalnya pada pengujian penentuan jumlah bakteri.
• Erlenmeyer
Sebuah labu Erlenmeyer, juga dikenal sebagai labu berbentuk kerucut, adalah jenis labu laboratorium yang banyak digunakan. Memiliki tubuh berbentuk kerucut, leher silinder dan dilengkapi dengan dasar yang datar. Alat ini dinamai menurut nama kimiawan asal Jerman Emil Erlenmeyer, yang menciptakannya pada tahun 1860.
Labu Erlenmeyer adalah wadah berbentuk kerucut dengan leher, sehingga anda dapat memegang labunya atau mencantelkan sebuah penjepit atau menggunakan stopper. Labu Erlenmeyer digunakan untuk mengukur, mencampur dan menyimpan cairan. Bentuknya membuat botol ini sangat stabil. Alat laboratorium ini adalah salah satu alat yang paling umum digunakan dalam laboratorium kimia. Kebanyakan Labu Erlenmeyer terbuat dari kaca borosilikat sehingga Erlenmeyer dapat dipanaskan dengan api atau autoclaved. Ukuran yang paling umum dari Labu Erlenmeyer adalah 250 ml dan 500 ml. Labu Erlenmeyer juga terdapat dalam ukuran 50 125, 250, 500, 1000 ml. Labu Erlenmeyer dapat disegel dengan gabus atau stopper atau tempat plastik atau film parafin atau watch glass di atas mereka.
• Mortar dan Pestle
Mortar dan Pestle adalah alat yang digunakan untuk menghancurkan suatu bahan atau sample seperti daun, akar, seedling, biji, dan lain-lain, untuk tujuan isolasi DNA, RNA, atau protein.
Mortar adalah bagian wadahnya, sedangkan pestle adalah bagian batang yang dipegang. Lama penggerusan sangat tergantung jenis bahan, kekuatan penggerus, dan keahlian menggunakan alat tersebut.
• Gelas Beker
Beker dapat terbuat dari kaca (umumnya kaca borosilikat ataupun dari plastik. Beker yang digunakan untuk menampung zat kimia yang korosif seperti asam atau zat-zat lainnya yang sangat reaktif biasanya terbuat dari PTFE ataupun bahan-bahan yang reaktivitasnya rendah.
Beker atau kadangkala disebut sebagai gelas beker adalah sebuah wadah penampung yang digunakan untuk mengaduk, mencampur, dan memanaskan cairan yang biasanya digunakan dalam laboratorium. Beker secara umum berbentuk silinder dengan dasar yang bidang dan tersedia dalam berbagai ukuran, mulai dari 1 mL sampai beberapa liter.
Beker dapat ditutup dengan kaca pengamat untuk mencegah kontaminasi dan penyusutan zat. Beker seringkali dibubuhi dengan ukuran yang terdapat pada sisi beker yang mengindikasikan volume tertampung. Sebagai contoh, beker dengan volume 250 mL ditandai dengan garis-garis yang mengindikasikan volume zat tertampung sebesar 50, 100, 150, 200, dan 250 mL. Keakuratan ukuran ini sangat bervariasi.
• Gelas drigalsky
Menyebarkan suatu biakan atau cairan dipermukaan medianya. Bentuknya segitiga kecil dan biasanya digunakan untuk meratakan suatu media dalam praktikum. Drigalsky terbuat dari kaca dengan bentuk pipa lurus namun pada salah satu bagian ujungnya berbentuk segitiga.
• Pembakar Bunsen
Pembakar Bunsen (Bunsen Burner) Salah satu alat yang berfungsi untuk menciptakan kondisi yang steril adalah pembakar bunsen. Untuk sterilisasi jarum ose atau yang lain, bagian api yang paling cocok untuk memijarkannya adalah bagian api yang berwarna biru (paling panas). Perubahan bunsen dapat menggunakan bahan bakar gas atau metanol.
• Cover glass dan Preparat
Preparat adalah kaca tipis beebentuk persegi panjang yang digunakan untuk meletakkkan objek preparat yang sudah bipotong tipis, untuk diamati dengan menggunakan mikroskop cahaya. Cover glass adalah kaca persegi yang berfungsi menutup objek preparat yang ada di kaca preparat.
• Tabung Durham
Tabung Durham merupakan alat yang digunakan di dunia mikrobiologi untuk mendeteksi produksi gas yang dihasilkan dari mikroorganisme. Alat ini berukuran sangat kecil, ditempatkan pada tabung reaksi yang telah berisi cairan pertumbuhan mikroorganisme dan zat indikator yang dapat menandai terjadinya perubahan warna karena adanya perubahan derajat keasaman dan gas yang dihasilkan. Produksi gas dicirikan dengan terdapatnya gas di ujung tabung durham setelah mikroorganisme diinokulasi dan diinkubasi. Penggunaan tabung durham ini biasa dilakukan pada pengujian biokimia dalam identifikasi bakteri. Metode ini pertama kali ditemukan oleh seorang ahli mikrobiologi pada tahun 1898 yang bernama Herbert Durham.
Selain dari alat-alat di atas, terdapat pula jenis alat yang sederhana. Sederhana yang dimaksud adalah adalah alat yang dalam penggunaanya tidak diperlukan tehnik-tehnik khusus, sehingga semua praktikan dapat menggunakannya sendiri. Beberapa alat tersebut yaitu:
• Jarum Ent
Jarum Ent berfungsi untuk memindahkan biakanuntuk ditanam/ditumbuhkan ke media baru. Jarum Ent biasanya terbuat dari kawat nichrome atau platinum sehingga dapat berpijar jika terkena panas.
• Jarum Ose
Jarum Ose berfungsi untuk menginokulasi kultur mikrobia khususnya mikrobia aerob dengan metode streak juga untuk mengambil dan menggores MO yang terdiri dari ose lurus untuk menanam MO dan ose bulat untuk menggores MO yang biasanya berbentuk zig-zag.
• Pinset
Pinset alat yang terbuat dari besi. Pinset (yang ujungnya lancip), digunakan untuk mengambil atau menarik beberapa sampel.fungsi pinset itu untuk menjepit benda kecil atau pun yang sangat lembek(lembut).
• Rubber Bulb
Pipet Filler atau Rubber Bulb adalah alat untuk menyedot larutan yang dapat dipasang pada pangkal pipet ukur. Prinsip kerja dari Rubber bulb yaitu karet sebagai bahan filler merupakan karet yang resisten bahan kimia. Filler memiliki 3 saluran yang masing-masing saluran memiliki katup. Katup yang bersimbol A (aspirate) berguna untuk mengeluarkan udara dari gelembung. S (suction) merupakan katup yang jika ditekan maka cairan dari ujung pipet akan tersedot ke atas. Kemudian katup E (exhaust) berfungsi untuk mengeluarkan cairan dari pipet ukur.
• Mikropipet
Mikropipet adalah alat untuk memindahkan cairan yang bervolume cukup kecil, biasanya kurang dari 1000 μl. Banyak pilihan kapasitas dalam mikropipet, misalnya mikropipet yang dapat diatur volume pengambilannya (adjustable volume pipette) antara 1μl sampai 20 μl atau mikropipet yang tidak bisa diatur volumenya hanya tersedia satu pilihan volume (fixed volume pipette) misalnya mikropipet 5 μl dalam penggunaannya, mukropipet memerlukan tip.
Sedangkan untuk alat-alat yang cukup besar dan rumit dalam penggunaannya, sehingga diperlukan panduan khusus atau bahkan harus memiliki tehnisi sendiri yaitu:
• pH Meter Universal
PH adalah tingkat keasaman atau kebasa-an suatu benda yang diukur dengan menggunakan skala pH antara 0 hingga 14. Sifat asam mempunyai pH antara 0 hingga 7 dan sifat basa mempunyai nilai pH 7 hingga 14.
PH meter digunakan untuk mengukur tingkat keasaman dan kebasa-an.
Cara kerja alat ini adalah dengan cara mencelupkan kedalam air yang akan diukur (kira-kira kedalaman 5cm) dan secara otomatis alat bekerja mengukur.
Pada saat pertama dicelupkan angka yang ditunjukkan oleh display masih berubah-ubah, tunggulah kira-kira 2 sampai 3 menit sampai angka digital stabil.
• Mikroskop Majemuk
Mikroskop majemuk merupakan mikroskop yang dilengkapi dengan dua lensa cembung aau lebih. Tinggi pembesaran yang dihasilkan oleh lensa ini bersama-sama memungkinkan sebuah bayangan rinci tentang mikro-organisme, sel dan jaringan. Zacharians Janssen adalah pembuat lensa dari Belanda, ia menciptakan mikroskop majemuk pada tahun 1590. Kemudian Galileo meluncurkan versi mikroskopnya pada tahun 1610. Setelah itu beberepa ilmuwan lain dan penemu, mulai membantu memperbaiki desain dan kemampuan kerja mikroskop.
Desain dasar mikroskop majemuk terdiri dari lensa cembung yang dipasang di kedua ujung tabung hampa. Tabung ini dipasang pada adjustable, neosepiece rotary. Lensa atas mikroskop majemuk yang dekat dengan mata pengamat adalah lensa okuler atau lensa mata. Dan yang dekat dengan beda/objek disebut lensa objektif. Perbesaran yang dapat dilakukan oleh mikroskop majemuk adalah 4x, 10x, 40x, 100x, bahkan 1000x.
• Mikroskop stereo
Mikroskop stereo (Zoom Stereo Microscope) memiliki fungsi untuk melihat objek yang membutuhkan perbesaran tidak terlalu besar. Di Laboratorium Mikrobiologi, mikroskop stereo biasanya digunakan untuk mengamati secara detail bentuk koloni dan jamur.
• Oven
Oven adalah suatu peralatan yang berfungsi untuk memanaskan ataupun mengeringkan. Biasanya digunakan untuk mengeringkan peralatan gelas laboratorium, zat-zat kimia maupun pelarut organik. Dapat pula digunakan untuk mengukur kadar air. Suhu oven lebih rendah dibandingkan dengan suhu tanur yaitu berkisar antara 105ºC.
• Autoklaf
Autoklaf adalah alat untuk mensterilkan berbagai macam alat dan bahan yg digunakan dalam mikrobiologi menggunakan uap air panas bertekanan. Prinsip kerja alat ini yaitu dengan memasukkan medium yang ingin disterilkan, selanjutnya penutup otoklaf dipasang dan sekrup dikencangkan. Keran pengatur tempat keluar uap air dibiarkan tetap terbuka hingga semua udara terdesak keluar. Apabila sterilisasi telah selesai autoklaf dibiarkan tekanan turun hingga nol. Kran uap air dibuka secara perlahan. Jangan membuka kran uap untuk mempercepat turunnya tekanan, tunggu sampai tekanan menunjukkan angka nol.
• Inkubator
Inkubator adalah alat dengan suhu atau kelembaban tertentu yang digunakan untuk menginkubasi atau memeram mikroba. Di dalam laboratorium mikrobiologi digunakan untuk menumbuhkan bakteri pada suhu tertentu, menumbuhkan ragi dan jamur, menyimpan biakan murni mikroorganisme I pada suhu rendah. Adapun ciri dari inkubator adalah memiliki sekat untuk menumbuh kembangkan mikroba, dalam inkubator terdapat sekat kaca pada pintunya yang berfungsi untuk mempermudah melihat mikroba yang sedang diinkubasi tanpa membuka dan benutup bagian dalam dari inkubator sehingga suhunya tetap terjaga. Prinsip kerjanya yaitu mengubah energi listrik menjadi energi panas. Kawat nikelin akan menghambat aliran elektron yang mengalir sehingga mengakibatkan peningkatan suhu kawat.
• Orbital Shaker
Orbital Shaker digunakan sebagai alat untuk homogenisasi campuran larutan, mempercepat proses pendinginan suatu larutan, dan menjaga aerasi tetap merata dan optimal dalam keperluan inkubasi sampel.
• Hot Plate
Hot Plate adalah suatu alat yang digunakan dalam proses pemanasan. Dalam laboratorium hot plate dapat digunakan sebagai pengganti dari pembakar bunsen. Alat ini memiliki prinsip kerja yaitu dengan mengubah energi listrik menjadi energi panas. Fungsi lain dari hot plate yaitu untuk membantu proses homogenitas larutan.
• Magnetik stirrer
Magnetik stirrer adalah perangkat laboratorium yang menggunakan medan magnet berputar menyebabkan bar aduk (juga disebut “kutu”) direndam dalam cairan berputar sangat cepat, sehingga aduk. Bidang berputar dapat dibuat baik oleh magnet berputar atau satu set elektromagnet stasioner, ditempatkan di bawah cairan. Fungsi dari alat ini adalah untuk mengaduk larutan agar menjadi homogen.
• Colony counter
Berfungsi sebagai penghitung jumlah colony bakteri atau jamur, cara menggunakannya setelah kita Onkan. Kita menyimpan cawan petri yang berisi bakteri atau jamur kedalam kamar hitung.
• Laminar Air Flow (LAF)
Biological Safety Cabinet (BSC) atau dapat juga disebut Laminar Air Flow (LAF) adalah alat yang berguna untuk bekerja secara aseptis karena BSC mempunyai pola pengaturan dan penyaring aliran udara sehingga menjadi steril dan aplikasisinar UV beberapa jam sebelum digunakan.
• Spectrophotometer
Spectrophometer adalah sebuah instrumen yang menggunakan spektrum cahaya sebagai kompenen utama pengukuran. Kemudian jelas pula kalau prinsipnya adalah serapan spektra cahaya tadi yang dilakukan oleh Atom – atom, ini yang spesialnya. Fungsi dari alat ini yaitu untuk menghitung nilai kepekatan dari suatu larutan atau cairan.
• Water Distiller
Water Distiller adalah alat yang diginakan untuk menyaring dan menyegarkan air. Sehingga air tersebut dapat digunakan untuk keperluan-keperluan dilaboratorium. Jika air yang akan digunakan tidak melalui proses ini, maka di khawatirkan akan terjadi kontaminan zat-zat yang tidak diinginkan.
IV. KESIMPULAN
Kesimpulan yang dapat diambil dari praktikum ini adalah sebagai berikut:
1. Alat-alat laboratorium yang terbuat dari kaca yaitu cawan petri, pipet ukur, pipet tetes, tabung reaksi, erlenmeyer, mortar& pestle, gelas beker, gelas drigalsky, pembakar bunsen, cover glass & preparat dan tabung durham.
2. Alat-alat laboratorium yang cukup sederhana dan mudah untuk digunakan yaitu jarum Ent, jarum Ose, pinset, ruber bulb dan mikropipet.
3. Peralatan yang cukup besar dan rumit penggunaanya di laboratorium yaitu pH meter universal, mikroskop majemuk, mikroskop stereo, oven, autoklaf, incubator, orbital shaker, hot plate, magnetic strirrer, colony counter, LAF, spectrophotometer, water distiller.
4. Sebagian alat-alat yang ada di laboratorium terbuat dari bahan gelas/kaca, hal ini dikarenakan gelas/kaca adalah media yang tidak midah kontaminan dan mudah dibersihkan sehingga tidak mengganggu jalannya proses penelitian.
DAFTAR PUSTAKA
Hadiutomo. 1990. Mikrobiologi Dasar Jilid I. Jakarta. Erlangga
Ibnu. 1976. Analisa Kimia Kuantitatif. JakartA. Erlangga
Khasani. 1990. Prosedur alat-alat Kimia. Yogyakarta. Liberty
Djide ,M. Natsir. 2006 . Mikrobiologi Farmasi Dasar. Makassar. Universitas Hasanuddin
Neilands. 1990. Analisa Kimia. Jakarta. Erlangga.
Sumanti, Debby M., dkk. 2008. Diktat Penuntun Praktikum Mikrobiologi Pangan. Jatinangor. Universitas Padjajaran
